CAPACIDAD EMBRIOGÉNICA DE CALLOS INDUCIDOS EN EJES EMBRIONARIOS CIGÓTICOS DE Agave angustifolia Haw

El uso como explantes de ejes embrionarios cigóticos de semillas de agave mezcalero (Agave angustifolia Haw), permitió inducir embriones somáticos (ES) in vitro, previa formación de callos embriogénicos. Se probaron dos concentraciones de las sales Murashige y Skoog (MS), 25 y 100 % de la original (MS-25 y MS-100), combinados con 0.0, 0.5, 1.0, 2.0 y 3.0 mg L-1 de ácido 2,4-diclorofenoxiacético (2,4-D), con 0.0 y 1.0 mg L-1 de 6-benciladenina (BA), y con 30 y 60 g L-1 de sacarosa. La mitad de los tratamientos fueron incubados bajo un fotoperíodo de 16 h luz (38 ¿mol m-2 s-1) y 8 h de oscuridad, y la otra mitad en completa oscuridad, para un total de 80 tratamientos. La inducción de callo se observó a los 4 días (d) después de iniciado el cultivo (DDIC) en condiciones de luz y a los 5 d en condiciones de oscuridad, independientemente del tratamiento, excepto en donde no se adicionaron reguladores del crecimiento vegetal (RCV) y en los suplementados sólo con BA. La formación de ES se observó a los 100 DDIC; este proceso se vio favorecido en callos embriogénicos previamente inducidos en el medio MS-25 adicionado con 60 g L-1 de sacarosa, 3.0 mg L-1 de 2,4-D y 1.0 mg L-1 de BA, en condiciones de oscuridad. Segar, sin RCV, y se logró regenerar plantas completas de A. angustifolia a los 140 DDIC. logró la germinación de todos los ES en el medio MS-50, 60 g L-1 de sacarosa y 8 g L-1 de agar, sin RCV, y se logró regenerar plantas completas de A. angustifolia a los 140 DDIC.

By using zygotic embryonic axis from seeds of agave mezcalero (Agave angustifolia Haw) as explants, it was possible to induce embriogenic calli in vitro, and from these calli we obtained somatic embryos (SE). Two concentrations of the Murashige and Skoog (MS) medium were used, 25 and 100 % concentrations (MS-25 and MS-100) combined with 0.0, 1.0, 2.0 and 3.0 mg L-1 of 2,4-dichlorophenoxiacetic acid (2,4-D), with 0.0 and 1.0 mg L-1 of 6-benzyladenine (BA), and 30 and 60 g L-1 sucrose. Cultures were incubated either under 16 h light (38 ¿mol m-2 s-1) and 8 h dark, or kept in complete darkness, for a total of 80 treatments. Callus formation was detected 4 days (d) after beginning the culture (DABC) under light conditions and 5 d in dark conditions, independently of the treatment, except where plant growth regulators (PGR) were not added and in those supplemented only with was observed at 100 DDIC; this process was favored in embryogenic calli induced with MS-25, 60 g L-1 of sucrose, 3.0 mg L-1 of 2,4-D and 1.0 mg L-1 of BA, and complete darkness. All SE germinated on the MS-50 medium supplemented with 60 g L-1 sucrose and 8 g L-1 agar, without PGR. With this protocol it is posible to regenerate complete plants of A. angustifolia in140 DABC.BA. SE formation was observed at 100 DDIC; this process was favored in embryogenic calli induced with MS-25, 60 g L-1 of sucrose, 3.0 mg L-1 of 2,4-D and 1.0 mg L-1 of BA, and complete darkness. All SE germinated on the MS-50 medium supplementednwith 60 g L-1 sucrose and 8 g L-1 agar, without PGR. With this protocol it is posible to regenerate complete plants of A. angustifolia in140 DABC.

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Resumen

Español El uso como explantes de ejes embrionarios cigóticos de semillas de agave mezcalero (Agave angustifolia Haw), permitió inducir embriones somáticos (ES) in vitro, previa formación de callos embriogénicos. Se probaron dos concentraciones de las sales Murashige y Skoog (MS), 25 y 100 % de la original (MS-25 y MS-100), combinados con 0.0, 0.5, 1.0, 2.0 y 3.0 mg L-1 de ácido 2,4-diclorofenoxiacético (2,4-D), con 0.0 y 1.0 mg L-1 de 6-benciladenina (BA), y con 30 y 60 g L-1 de sacarosa. La mitad de los tratamientos fueron incubados bajo un fotoperíodo de 16 h luz (38 ¿mol m-2 s-1) y 8 h de oscuridad, y la otra mitad en completa oscuridad, para un total de 80 tratamientos. La inducción de callo se observó a los 4 días (d) después de iniciado el cultivo (DDIC) en condiciones de luz y a los 5 d en condiciones de oscuridad, independientemente del tratamiento, excepto en donde no se adicionaron reguladores del crecimiento vegetal (RCV) y en los suplementados sólo con BA. La formación de ES se observó a los 100 DDIC; este proceso se vio favorecido en callos embriogénicos previamente inducidos en el medio MS-25 adicionado con 60 g L-1 de sacarosa, 3.0 mg L-1 de 2,4-D y 1.0 mg L-1 de BA, en condiciones de oscuridad. Segar, sin RCV, y se logró regenerar plantas completas de A. angustifolia a los 140 DDIC. logró la germinación de todos los ES en el medio MS-50, 60 g L-1 de sacarosa y 8 g L-1 de agar, sin RCV, y se logró regenerar plantas completas de A. angustifolia a los 140 DDIC.

Inglés By using zygotic embryonic axis from seeds of agave mezcalero (Agave angustifolia Haw) as explants, it was possible to induce embriogenic calli in vitro, and from these calli we obtained somatic embryos (SE). Two concentrations of the Murashige and Skoog (MS) medium were used, 25 and 100 % concentrations (MS-25 and MS-100) combined with 0.0, 1.0, 2.0 and 3.0 mg L-1 of 2,4-dichlorophenoxiacetic acid (2,4-D), with 0.0 and 1.0 mg L-1 of 6-benzyladenine (BA), and 30 and 60 g L-1 sucrose. Cultures were incubated either under 16 h light (38 ¿mol m-2 s-1) and 8 h dark, or kept in complete darkness, for a total of 80 treatments. Callus formation was detected 4 days (d) after beginning the culture (DABC) under light conditions and 5 d in dark conditions, independently of the treatment, except where plant growth regulators (PGR) were not added and in those supplemented only with was observed at 100 DDIC; this process was favored in embryogenic calli induced with MS-25, 60 g L-1 of sucrose, 3.0 mg L-1 of 2,4-D and 1.0 mg L-1 of BA, and complete darkness. All SE germinated on the MS-50 medium supplemented with 60 g L-1 sucrose and 8 g L-1 agar, without PGR. With this protocol it is posible to regenerate complete plants of A. angustifolia in140 DABC.BA. SE formation was observed at 100 DDIC; this process was favored in embryogenic calli induced with MS-25, 60 g L-1 of sucrose, 3.0 mg L-1 of 2,4-D and 1.0 mg L-1 of BA, and complete darkness. All SE germinated on the MS-50 medium supplementednwith 60 g L-1 sucrose and 8 g L-1 agar, without PGR. With this protocol it is posible to regenerate complete plants of A. angustifolia in140 DABC.